Analisador de Imunoensaio de Fluorescência

O imunoensaio de polarização de fluorescência (FPIA) é uma classe de teste bioquímico in vitro usado para detecção rápida de anticorpos ou antígenos na amostra. FPIA é um ensaio homogêneo competitivo, que consiste em um método simples de preparação e leitura, sem a necessidade de etapas de separação ou lavagem.

A base do ensaio é a anisotropia de fluorescência, também conhecida como polarização de fluorescência. Se uma molécula fluorescente estiver estacionária e exposta à luz polarizada no plano, ela ficará excitada e, consequentemente, emitirá radiação de volta ao plano polarizado. No entanto, se a molécula fluorescente excitada estiver em movimento (rotacional ou translacional) durante a vida útil da lâmpada, ela emitirá luz em uma direção diferente da do plano de excitação. A vida útil da lâmpada fluorescente é a quantidade de tempo entre o momento de absorção e o momento de emissão da lâmpada fluorescente.

Normalmente, a taxa na qual uma molécula gira é indicativa de seu tamanho. [1] Quando uma molécula marcada com fluorescência (marcador) se liga a outra molécula, o movimento rotacional muda, resultando em uma intensidade alterada da luz polarizada no plano, o que resulta em polarização alterada da fluorescência. [2] Os imunoensaios de polarização de fluorescência empregam um antígeno ligado ao fluoróforo que, quando ligado ao anticorpo de interesse, aumentará a polarização da fluorescência. A mudança na polarização é proporcional à quantidade de antígeno na amostra e é medida por um analisador de polarização por fluorescência. [3]